一、实验目的

探究益生元（动物双歧杆菌+植物乳杆菌+嗜酸乳杆菌+酵母菌），对产蛋鸡鸡舍氨气浓度、粪便理化指标及微生物数量的影响，评估其在改善养殖环境、降低环境污染方面的作用效果，为益生元在蛋鸡绿色养殖中的应用提供环境学依据。

二、实验材料与方法

1. 实验动物

选取180只280日龄的海兰褐产蛋鸡，随机分为对照组和实验组，每组90只，下设3个重复，每个重复30只。两组产蛋鸡初始状态一致，具有可比性。

2. 实验材料

◦ 实验用益生元：复合益生菌制剂，含动物双歧杆菌（活菌数≥5×10⁸ CFU/g）、植物乳杆菌（活菌数≥5×10⁸ CFU/g），嗜酸乳杆菌（活菌数≥5×10⁸ CFU/g），乳酸菌总菌数≥2.0x10⁸CFU/L，由利德尔药业公司提供。

◦ 基础日粮：参照《鸡饲养标准》（NY/T 33-2004）产蛋鸡高峰期营养需求配制全价配合饲料，其主要营养成分如下：代谢能11.50 MJ/kg，粗蛋白16.5%，钙3.5%，有效磷0.35%，赖氨酸0.85%，蛋氨酸0.38%。基础日粮不含任何益生元、抗生素及抗菌类添加剂。

◦ 主要试剂与仪器：氨气检测试剂盒；凯氏定氮仪；钼锑抗比色试剂盒；pH计；恒温培养箱；菌落计数器；大气采样器。

3. 实验设计

对照组：饲喂基础日粮，自由采食、饮水。

实验组：在基础日粮中添加益生元，1瓶兑水2000斤，自由饮水。

预试期7天，正试期45天。实验期间两组饲养管理条件一致，鸡舍为封闭式笼养舍，清粪周期为每日1次。

4. 检测指标与方法

（1）鸡舍氨气浓度测定

分别在正试期第10天、20天、30天、40天，于每日上午10:00（清粪后2h）、下午16:00（清粪前4h），采用大气采样器在鸡舍内不同区域（东、西、南、北、中）离地面1.5m高度采集空气样本，每个区域采集3次。使用氨气检测试剂盒，采用纳氏试剂分光光度法测定氨气浓度，单位为mg/m³，取平均值。

（2）粪便理化指标测定

每周采集每组每个重复的新鲜粪便样本500g，混合均匀后分为两份：一份用于测定pH值，采用pH计直接测定；另一份经自然风干、粉碎后，采用凯氏定氮法测定总氮含量，钼锑抗比色法测定总磷含量，计算单位鸡只每日氮、磷排放量。

（3）粪便微生物数量测定

正试期结束后，采集两组新鲜粪便样本，参照报告一的方法，梯度稀释后涂布于对应培养基，测定粪便中大肠杆菌、沙门氏菌、乳酸菌数量，结果以lg CFU/g粪便表示。

5. 数据统计与分析

采用SPSS 22.0统计软件进行数据分析，结果以“平均值±标准差”表示，组间差异采用t检验，P＜0.05为差异显著，P＜0.01为差异极显著。

三、实验结果

6. 益生元对鸡舍氨气浓度的影响

由表1可知，实验组鸡舍氨气浓度在各检测时间点均显著低于对照组（P＜0.05），清粪前的降低幅度大于清粪后。实验第40天，实验组上午氨气浓度较对照组降低38.5%，下午氨气浓度较对照组降低45.2%。

表1 益生元对鸡舍氨气浓度的影响（mg/m³）

7. 益生元对产蛋鸡粪便理化指标的影响

由表2可知，实验组粪便pH值显著低于对照组（P＜0.05）；实验组粪便总氮、总磷含量显著低于对照组（P＜0.05），单位鸡只每日氮排放量较对照组降低19.2%，磷排放量降低15.8%。

表2  益生元对产蛋鸡粪便理化指标的影响

8. 益生元对产蛋鸡粪便微生物数量的影响

由表3可知，实验组粪便中乳酸菌数量显著高于对照组（P＜0.05），大肠杆菌、沙门氏菌数量显著低于对照组（P＜0.05），沙门氏菌数量较对照组降低52.6%。

表3益生元对产蛋鸡粪便微生物数量的影响（lg CFU/g）

四、实验结论

9. 本实验所用复合益生元可显著降低产蛋鸡鸡舍内氨气浓度，减少有害气体对蛋鸡的呼吸道刺激，改善舍内空气质量。

10. 益生元能降低产蛋鸡粪便pH值，减少粪便中氮、磷排放量，降低粪便对土壤和水体的污染风险。

11. 益生元可优化产蛋鸡粪便微生物结构，增加有益菌数量，抑制有害菌繁殖，减少粪便中病原微生物的传播。

12. 综上，益生元可有效改善产蛋鸡养殖环境，助力蛋鸡绿色健康养殖。